شرح طريقة albert stain

albert stain أو صبغة البرت هي احد الطرق المعروفة للكشف عن البكتيريا، ويقدم لك موقع الموسوعة الغرض من هذه الصبغة ومكوناتها المعروفة، بالإضافة إلى الأدوات والخطوات الخاصة بهذه التجربة.

ما هو المقصود albert stain

تعتبر صبغة البرت أو albert stain احد التقنيات المعروفة لتمييز نوع محدد من أنواع البكتيريا، وتستعمل هذه التقنية لتوضيح تبدل الألوان في نوع بكتيريا الخناق الوتدية أو ما يعرف ” Corynebacterium diphtheria”.

وتستعمل هذه الصبغة لتمييز تغير الألوان في هذا النوع من البكتيريا، فعلى سبيل المثال عند القيام بصبغها بصبغة زرقاء، تبدو حمراء، بحيث يتم صبغة حبيبات فولتين في خلية البكتيريا.

مكونات صبغة البرت ستين

تتكون صبغة البرت albert stain من نوعين من الكواشف هما:

• النوع الأول يتكون من 15 gm من التولويدين الأزرق ، و 0.20 gmمن مادة التلوينMalachite green بالاضافة إلى واحد  مللي من حمض الأسيتيك الجليدي و 2 مللي من الكحول.
• النوع الثاني يحتوي على 2 جرام من اليود مضاف اليهم 3 جرام من يوديد الصوديوم

طريقة إجراء albert stain

الادوات المطلويبة لاجراء التجربة

• شريحة زجاجية نظيفة.
• كاشف البرت الاول A
• كاشف البرت الثاني B
• جهاز مجهر
• زيت يتم استعماله للغمر.
• ورق نشاف.
• مكان مخصص للصبغة.

خطوات عمل تجربة صبغة البرت ستين

يجب أن تقوم بتحضير كافة متطلبات التجربة أولاً قبل البدء، ثم القيام بالخطوات التالية:

• قم بتحضير احد أغشيه البكتيريا من احد المستعمرات البكتيرية.
• قم بإحضار صبغة البرت الأولي A التي سبق وتم إعداداها من قبل.
• قم بغمر الشريحة الخاصة بالبكتيريا في صبغة البرت وتركها لمدة تتراوح من 3 إلي 7 دقائق.
• قم بالتخلص من الزائد من الصبغة أولاً.
• قم بغسل الشريحة في صبغة البرت الثانية B المكونة من اليود.
• لا تقم بغسل الشريحة في الماء حتى لا تفسد.
• ضع الشريحة في مكانها واتركها لمدة دقيقتان كاملتان.
• قم بالتخلص من الصبغة الزائدة Albert stain B أولاً.
• قم بعد ذلك بغسل الشريحة بالماء العادي.
• قم بتجفيف الشريحة بالاستعانة بالورق النشاف.
• ضع الشريحة تحت المجهر وشاهدها.

نتائج التجربة

• ستلاحظ بعد الانتهاء من التجربة أن بكتيريا الخناق الوترية موجودة في العينة وتظهر باللون الأخضر.
• وتظهر البكتيريا بزاوية معينة بجوار بعضها البعض في العينة.
• تظهر البكتيريا بشكل حرف L و حرف V أو بشكل حروف صينية.
• وتستعمل هذه التجربة في الكشف عن وجود بكتيريا Corynebacterium diphtheriae وتمييزها عن بقية أنواع البكتيريا.